规格编号 | 规格 | 市场价 | 会员价 | 数量 | 加入购物车 |
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ES014-1mL | 1mL | ¥20.00 |
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ES014-2*1mL | 2*1mL | ¥30.00 |
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ES014-5*1mL | 5*1mL | ¥60.00 |
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产品简介:
Phos-key是一种能与磷酸分子特异性结合的双核金属络合物,用于分离和检测磷酸化蛋白。在常规SDS-PAGE凝胶中加入Phos-key和二价金属离子(Mn2+或Zn2+)即可分离不同条带中的磷酸化和非磷酸化蛋白。在电泳时,固定在凝胶上的Phos-key复合物可以特异性结合磷酸化蛋白,使得磷酸化蛋白电泳迁移率降低,从而实现磷酸化和非磷酸化蛋白的分离。能检测不同形式的磷酸化蛋白,不受磷酸化抗体限制,可用于免疫印迹、质谱分析等。
3×磷酸化蛋白上样缓冲液是一种专门设计用于Phos-key SDS-PAGE的上样缓冲液,专用于磷酸化蛋白样品的上样。本产品为中性配方,适用于在pH 5 - 8的生理环境下生成稳定的复合物。本产品含SDS和β-巯基乙醇。
保存条件:-20℃保存,有效期12个月。
实验步骤:(仅供参考)
1.按照每2 μL蛋白样品加入1 μL上样缓冲液(3×)的比例混合;
2.混匀后,95℃孵育5 - 10 min,以充分变性蛋白;
3.冷却至室温后,用微量移液枪上样到 PAGE 胶加样孔内;
4.当溴酚蓝到达 PAGE 胶底部附近时即可停止电泳。
Phos-key SDS-PAGE样品制备的要求:
1.确保样本中不含有 EDTA 等金属离子螯合剂;
2.样品中含有的还原剂、变性剂、螯合剂、钒酸等会使电泳条带发生弯曲或者拖尾,可通过TCA沉淀或透析脱盐降低杂质含量;
3.避免样品中含有高浓度的还原剂,变性剂,表面活性剂等;β-巯基乙醇浓度不高于0.2 M(或者5%);
4.ATP使用浓度在2.0 mM时,对实验结果无显著影响,具体使用范围尚不清楚;
5.样品可以为纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液,且样品来源无物种特异性。
注意事项:
1.本产品为 3× 母液。
2.建议分装冻存,避免反复冻融。
3.仅限于专业人员科学研究用,不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿戴好个人防护装备和实验服装进行操作。